Kako rastu gljive od spora

Autor: Randy Alexander
Datum Stvaranja: 1 Travanj 2021
Datum Ažuriranja: 13 Svibanj 2024
Anonim
Uzgoj gljiva (prebacivanje spora)
Video: Uzgoj gljiva (prebacivanje spora)

Sadržaj

Gljive se mogu uzgajati iz spora ili kulture tkiva. Spore kulture rezultiraju populacijama genetski različitih gljiva. To je korisno pri izoliranju i testiranju novih sojeva. Postupci razvoja gljiva specifični su za pojedine vrste. Pretpostavlja se da proizvođač zna kako uzgajati gljivu od interesa, osobito kada se dobije dovoljno potomstva.


smjerovi

Zbirka Agaricus gljiva (Fotografije Iana Granta, Jasona Hollingera)

    Priprema materijala

  1. Pripremite 500 do 1000 ml MEA prema uputama proizvođača.

  2. Stavite otopinu natrijevog klorida u epruvete i MEA u Erlenmeyerove tikvice. Nemojte puniti cijevi i bočice više od pola puta i lagano ih prekriti.

  3. Sterilizirajte otopinu natrijevog klorida, MEA i Petrijeve posude (ako nije sterilna) u loncu pod tlakom na 121 stupanj Celzija i 1 atm za 15 do 20 minuta.

  4. Uklonite MEA, otopinu natrijevog klorida i Petrijeve posude iz ekspres lonca i ostavite da se ohladi.

  5. Kada se MEA dovoljno ohladi za rukovanje, ali prije učvršćivanja, pažljivo podignite poklopac sa svake petrijeve zdjelice i ulijte 10 do 20 ml rastaljenog MEA.

  6. Pustiti da se MEA i ploče natrijevog klorida ohlade na sobnu temperaturu.


    Stavljanje spora na ploče

  1. Sterilizirajte kuku u alkoholnoj lampi. Pustite da se žica zagrije dok ne pocrveni, a zatim neka se ohladi 5 sekundi.

  2. Uronite kuku u otopinu natrijevog klorida kako biste skupili kap tekućine. Spread kapljicu na malom području u dojam spore (ili drugi izvor spore) stvoriti tekućinu / spora smjesu. Ponovite ovaj postupak nekoliko puta, sterilizirajte kuku između svake.

  3. Uvucite kuku u suspenziju natrijevog klorida i spore, kako biste skupili spore.

  4. Podignite poklopac ploče agara što je više moguće kako biste omogućili pristup kuki.

  5. Raspršite suspenziju spora s kuke na površinu agara i ponovno uzmite ploču. Ponovite onoliko karata koliko želite (najmanje pet ili šest).

  6. Zatvorite ploče agara plastičnom folijom kako biste spriječili suhoću. Inkubirajte spore na odgovarajućim temperaturama i svjetlosnim uvjetima za tu vrstu.


  7. Promatrajte znakove svakih nekoliko dana, tražeći znakove klijanja. Bijeli pahuljasti rast (micelij) na površini agara ukazuje na prisutnost gljivice (ali ne može biti gljiva koja je izrasla iz spora).

    Uzgoj gljiva iz spora

    Izoliranje čiste kulture

  1. Usporedite micelij s objavljenim opisima micelija koji pokušavate rasti.

  2. Ako micelij izgleda kao očekivano, očistite kulturu izrezivanjem komada i prebacivanjem na svježe agar ploče.

  3. Nastavite rezati dijelove iz vrha kolonija koje se šire sve dok čista kolonija nije oslobođena bakterija.

    Priprema potomstva

  1. Izrežite i prenesite komade pročišćenog micelija u sterilizirane staklenke ili supstrat drvne sječke. Vrsta supstrata ovisi o vrsti gljiva.

  2. Inkubirajte glavni micelij u uvjetima prikladnim za vrstu dok supstrat ne bude potpuno koloniziran micelijom.

  3. Povremeno protresite spremnike micelija kako biste fragmentirali supstrat i ubrzali kolonizaciju.

  4. Koristite glavni micelij za inokulaciju drugih spremnika i proizvode više micelija.

    Inokulira supstrat za rast gljiva

  1. Stresajte posude micelija snažno, da ih fragmentirate.

  2. Postavite micelije u vrećice ili podloge za rast gljiva.

  3. Pažljivo promiješajte micelije na podlozi, miješajući ili miješajući.

  4. Nastavite prema objavljenim metodama kako uzgajati micelij i započeti proces plodonošenja kultiviranih vrsta.

savjeti

  • Radite brzo kada sipate agar ili prenesete inokulum kako biste smanjili kontaminaciju.
  • Vrijeme i trud se mogu uštedjeti kupnjom sterilnih i unaprijed pripremljenih agar ploča.
  • MEA je dobar opći medij za uzgoj gljiva, ali druga vrsta medija može biti prikladnija ovisno o vrsti.

upozorenje

  • Štednjaci mogu se zagrijati i uzrokovati ozljede. Slijedite upute proizvođača za održavanje i uporabu.
  • Sterilizirani spremnici su vrući i moraju se rukovati rukavicama otpornima na toplinu kako bi se spriječile opekline i izlijevanje.
  • Pustite da se poklopci posude steriliziraju kako bi se omogućilo izjednačavanje tlaka tijekom procesa grijanja i hlađenja.
  • Svi spremnici za sterilizaciju moraju biti izrađeni od materijala koji se može autoklavirati.

Što vam je potrebno

  • Spore gljiva
  • Agar za ekstrakciju slada (MEA)
  • Petrijeve zdjelice (ploče)
  • Supstrat pogodan za vrste
  • Alkoholna svjetiljka
  • Kuka za inokulaciju
  • Otopina natrijevog klorida (0.9% W / V)
  • Lonac za tlak
  • Testne cijevi
  • Erlenmeyerove tikvice
  • Plastični film
  • Posude ili vrećice za proizvodnju micelija