Sadržaj
UFC je skraćenica od Colony Forming Units, izraz koji se koristi u mikrobiologiji za kvantificiranje broja bakterija prisutnih u otopini. Ovisno o koncentraciji uzorka, bit će potrebno izvršiti više razrjeđenja i staviti uzorke u Petrijeve zdjelice. Ako ima mnogo kolonija bakterija, brojanje će biti teško, a ako ih je malo, uzorak možda neće biti reprezentativan. Općenito je dobra ideja staviti uzorke izvorne otopine na ploče, jedno 1/10 razrjeđenje (1 dio otopine i 9 dijelova fiziološke otopine), jedno 1/100 razrjeđenje i jedno 1/1000 razrjeđenje.
Izračunajte CFU iz bakterijskih razrjeđenja
Korak 1
Izvršite preliminarno brojanje svake ploče nakon vremena inkubacije bakterija, obično dan ili dva. Trebali biste brojati samo pojedinačne kolonije, koje bi trebale biti zasebne izolirane točke, a ne skupovi kolonija koje su rasle zajedno. Odaberite ploču koja ima više od 30 i manje od 300 kolonija.
Korak 2
Prebrojite broj pojedinih kolonija. Ovo je UFC broj vašeg razrjeđenja - morate izvršiti jednostavan izračun da biste odredili UFC iz izvornog uzorka. Za ovaj će se primjer upotrijebiti hipotetska ploča koja sadrži 46 kolonija.
3. korak
Odredite veličinu razrjeđenja koju ste koristili. Idealno bi bilo da na početku eksperimenta označite Petrijeve posude. U ovom ste primjeru možda pomiješali 1 ml bakterijske kulture s 99 ml fiziološke otopine. To stvara 1/100 razrjeđenje.
4. korak
Pomnožite stupanj razrjeđenja s količinom koju ste stavili na tanjur. Ako u ovom primjeru na agar stavite 0,1 ml svog razrjeđenja 1/100, morate pomnožiti 0,1 x 1/100 za rezultat 1/1000 ili 0,001.
Korak 5
Podijelite UFC broj razrjeđenja (broj kolonija koje ste prebrojali) s rezultatom dobivenim u koraku 4. Za ovaj biste primjer podijelili 46 s 1/1000, što je isto kao množenje s 1000. Rezultat je 46000 UFC u izvorni uzorak.