Sadržaj
Serijska razrjeđenja koriste se u kemijskim i biološkim laboratorijima uglavnom za izvođenje pokusa. Obično su predstavljeni na logaritamskim skalama ili u višekratnicima od 10. Većinu vremena bakterije, stanice i otopljene tvari razrijede se da bi djelovale kao kontrolori u eksperimentima. Razrjeđenja i dalje daju visok stupanj točnosti u eksperimentima s odgovorom na dozu, gdje su svi uzorci izvedeni iz iste šarže. Uz to, možda će biti potrebne za smanjenje broja čestica u uzorku za upotrebu u automatiziranoj opremi. Serijska razrjeđenja dovršavaju se uzimajući mali volumen izvornog uzorka, ulivajući ga u novu bocu i vraćajući ga razrijeđenom otopini u izvorni volumen. Opća je formula: početna koncentracija / faktor razrjeđenja = nova koncentracija. U dolje navedenom primjeru izračunati ćemo serijsko razrjeđivanje od 10 ml od 2,5x10 ^ 7 stanica / ml do 25 stanica / ml s faktorom razrjeđenja 100.
Korak 1
Prije rukovanja tvarima stavite naočale i rukavice.
Korak 2
Označite tri epruvete pomoću bojice kako slijedi: 2,5 x 10 ^ 5, 2,5 x 10 ^ 3, 25 stanica / ml.
3. korak
Koristite formulu (izvorna koncentracija stanica / faktor razrjeđenja = nova koncentracija) za rješavanje prvog razrjeđenja. Izvorna koncentracija bit će 2,5x10 ^ 7, faktor razrjeđenja 100 i rezultat nove koncentracije ovog koraka bit će 2,5x10 ^ 5 stanica / ml.
4. korak
Razrijedite izvorni uzorak do 2,5x10 ^ 7 stanica / ml faktorom 100. Uklonite 1 ml izvorne otopine odgovarajućom pipetom i ulijte u epruvetu s natpisom "2,5 x 10 ^ 5 stanica / ml". S drugom pipetom ulijte dodatnih 99 ml vode u epruvetu da dovršite željeno razrjeđenje.
Korak 5
Stanice ponovno razrijedite za još jedan faktor 100. Uklonite na isti način kao i prije, ali sada s 1 ml epruvete od 2,5 x 10 ^ 5 stanica / ml unutar epruvete s oznakom "2,5 x 10 ^ 3 stanice / ml. ". U ovu novu epruvetu ponovno dodajte 99 ml vode da biste dovršili razrjeđenje, što će rezultirati 2,5 x 10 ^ 3 stanice / ml.
Korak 6
Razrijedite stanice sada posljednji put. Ponovite isti postupak kao prije ulijevanja u epruvetu s oznakom "25 stanica / ml". Dodajte 99 ml vode da dovršite postupak i postignete željeno razrjeđenje od 25 stanica / ml.