Zašto se ploče agara drže obrnute kad god je to moguće?

Sadržaj

• Bakterijske ploče agara
• Punjenje agar ploča
• Pohrana ploča agara
• Obrnute ploče agara tijekom skladištenja
• Povratne ploče agara tijekom inokulacije i inkubacije

Agar ploče koriste znanstvenici u staničnoj i molekularnoj biologiji za izvođenje istraživačkih eksperimenata. To su plastične Petrijeve posude napunjene agara pomiješane s hranjivim tvarima koje omogućuju rast različitih mikroorganizama, kao što je bakterija E. coli. Smatraju se zajedničkim potrošačkim materijalom u laboratorijima, jer se koriste brzo i obično se obavljaju interno, u velikim serijama, a zatim pohranjuju.

Tablice agara koriste se u biološkim laboratorijima za uzgoj bakterija i drugih mikroorganizama (Slika kolonija bakterija od ggw iz Fotolia.com)

Bakterijske ploče agara

Ovi plakovi se općenito proizvode u znanstvenim tehničarima koji sadrže laboratorijski agar u bakterijskom mediju za kulturu, kao što je Luria-Bertani, SOC, Terrific ili metilen blue eozin. Priprema agar kulture medija je dopunjena drugim faktorima koji mogu biti potrebni da bi bakterije preživjele ili specifični antibiotik (npr. Ampicilin ili kanamicin) kako bi se spriječio rast neželjenih bakterija.

Punjenje agar ploča

Agar ploče se pripremaju jednostavnim miješanjem kombinacije hranjivih tvari i agara s uravnoteženom pH otopinom soli i zagrijavanjem do taljenja. Nakon što se malo ohladi, dodaju se dodaci koji su osjetljivi na toplinu. Ta se smjesa ulijeva dok je još topla (i stoga ukapljena) na dno svake Petrijeve zdjelice; ostavi se da se osuši i skrutne na površini na koju se mogu staviti bakterijske suspenzije. Nakon što se ploče potpuno ohlade, one se označavaju i čuvaju do uporabe. Pravilno skladištenje ploča agara je važno kako bi se osiguralo da se ispravne bakterije uzgajaju i da se ne pojavi neželjena kontaminacija, što može ometati eksperimentalne rezultate.

Pohrana ploča agara

Postoji nekoliko načina za pohranu agar ploča, ovisno o tome koje dodatke sadrže. Ako su dostupni lagani dodaci, ploče se čuvaju u mraku, zamotavaju u foliju ili čuvaju u laganom spremniku. Ploče se uvijek čuvaju u hladnjaku ili laboratorijskom hladnjaku na 4 stupnja Celzijusa ili 39,2 stupnjeva celzijusa. Hlađenje može spriječiti ili smanjiti rast neželjenih bioloških zagađivača.

Obrnute ploče agara tijekom skladištenja

Neiskorištene ploče uvijek se preokreću ili okreću na poklopce tijekom skladištenja. To je učinjeno kako bi se spriječilo pojavljivanje isparavanja ako se plak pohrani na dulje vrijeme, što može utjecati na učinkovitost rasta bakterija ili omogućiti umnožavanje neželjenih organizama kao što su plijesni.

Povratne ploče agara tijekom inokulacije i inkubacije

Kada se plakovi napune vlažnom suspenzijom bakterija, treba je ostaviti da se lagano ispari prije inkubacije preko noći. Međutim, još uvijek će biti prisutna umjerena količina vlage. Ako se plak ne invertira tijekom inkubacije, bakterije se neće moći pravilno pričvrstiti na agar, što će ih ili spriječiti da rastu i formiraju kolonije na odgovarajući način ili potiču rast neželjenih mikroorganizama. Svaki od ovih rezultata poništit će eksperiment. Osim toga, bilo kakva kondenzacija ili vlaga mogu uzrokovati zbijanje, što će otežati odabir i analizu zasebnih kolonija. Nakon što bakterije formiraju kolonije, plak se također sprema naopako kako bi se održala razina vlage.